La nostra piattaforma di Sintesi Peptidica in Fase Solida (SPPS) produce peptidi substrato specifici progettati attorno a legami scissili mirati per proteasi, peptidasi e chinasi. Ciascuna sequenza è assemblata sotto rigoroso controllo stereochimico e purificata secondo le specifiche richieste (≥95% o ≥98% tramite HPLC), con convalida analitica mediante LC-MS.
La sensibilità dei saggi enzimatici dipende dalla precisione delle chimiche di bioconiugazione. Attraverso la nostra piattaforma di modificazione, introduciamo fluorofori (AMC, AFC), cromofori (pNA), coppie donatore-quencher FRET (EDANS/DABCYL, MCA/DNP), siti di fosforilazione e marcature con biotina per garantire risposte cinetiche prive di interferenze steriche.
Disponendo di reattori automatizzati ad alta capacità e colonne cromatografiche preparative industriali, i nostri impianti scalano la sintesi da lotti di test in milligrammi fino a forniture commerciali di diversi chilogrammi per kit diagnostici e campagne di screening farmacologico ad alto rendimento.
La nostra piattaforma sintetizza peptidi substrato per le principali classi di enzimi: serin-proteasi (tripsina, trombina, fattore Xa), cistein-proteasi (caspasi, catepsine), proteasi aspartiche e metalloproteasi (BACE1, MMP), esopeptidasi (DPP-IV, amminopeptidasi) e chinasi con siti specifici di fosforilazione.
La scelta della sonda dipende dalla tecnica di lettura. Tramite i nostri servizi di modificazione peptidica, leghiamo fluorofori (AMC, AFC) o cromofori (pNA) all'estremità C-terminale del residuo di taglio. Per le endopeptidasi, inseriamo coppie FRET (EDANS/DABCYL) ai lati opposti del legame scissile per generare un segnale in tempo reale privo di fluorescenza basale.
Ciascun lotto rilasciato è corredato da un Certificato di Analisi (COA) completo, tracciati RP-HPLC che attestano la purezza e spettrometria di massa (ESI-MS) per la conferma dell'identità molecolare. Su richiesta si effettuano verifiche di umidità residua (Karl Fischer), dosaggio dei controioni e prove di solubilità.
Sì. Per enzimi non caratterizzati, i nostri specialisti progettano la sequenza ottimale sui motivi consenso della proteina bersaglio, inseriscono spaziatori neutri (β-Ala, Ahx) e sintetizzano librerie di candidati tramite la sintesi di peptidi su misura.
Tramite i nostri impianti di sintesi peptidica su larga scala, gestiamo la transizione da quantitativi pilota in milligrammi a lotti commerciali di svariati chilogrammi, assicurando parametri cinetici (Km, kcat) stabili e perfettamente riproducibili tra i lotti.
In qualità di CDMO peptidica integrata, forniamo ottimizzazione del processo, isolamento delle impurezze, convalida di metodi analitici e documentazione regolatoria per accelerare lo sviluppo di saggi e l'omologazione di kit diagnostici.
I peptidi substrato sono sequenze sintetiche specificamente progettate per fungere da bersagli biologici di idrolisi o modificazione enzimatica. Introducendo gruppi reporter che modificano le proprietà spettrali in seguito all'azione catalitica, i substrati trasformano un evento biomolecolare in un segnale quantificabile: emissione fluorescente, assorbanza ottica o chemiluminescenza. Per gli enzimologi, i laboratori di screening farmacologico ad alto rendimento (HTS) e i produttori di kit diagnostici in vitro (IVD), la specificità di taglio, l'elevata purezza chimica e un ottimale rapporto segnale/rumore sono i parametri determinanti.
Le peptidasi e le proteasi catalizzano la rottura dei legami ammidici sfruttando specifiche tasche all'interno del sito catalitico attivo (sub-siti da S4 a S4'), che riconoscono i corrispondenti amminoacidi del substrato (da P4 a P4'). Un peptide substrato sintetico riproduce con precisione tale sequenza di riconoscimento e posiziona la sonda reporter a ridosso del legame scissile (tra P1 e P1'), garantendo un'efficienza catalitica analoga a quella del substrato proteico naturale.
La natura del gruppo reporter definisce la tecnologia analitica e la sensibilità del saggio:
La sintesi dei substrati peptidici affronta sfide chimiche specifiche per ciascuna famiglia:
Attraverso i nostri servizi di modificazione peptidica, introduciamo spaziatori neutri o catene PEG per evitare impedimenti sterici nell'interazione con il sito catalitico dell'enzima. Sintetizziamo inoltre i metaboliti di degradazione come standard analitici per la convalida dei metodi.
La produzione su vasta scala di reagenti per kit diagnostici e campagne HTS richiede una riproducibilità cinetica assoluta tra i lotti. I nostri impianti di sintesi peptidica su larga scala garantiscono forniture continue su scala di chilogrammi mediante reattori industriali automatizzati e sistemi HPLC preparativi dedicati. Inseriti nell'offerta di CDMO peptidica, forniamo dossier tecnici completi e supporto analitico per accelerare lo sviluppo di test diagnostici e piattaforme di screening farmaceutico.
I peptidi substrato illustrati in questa piattaforma sono forniti esclusivamente come materie prime per la ricerca di laboratorio, l'ottimizzazione di saggi e la fabbricazione di kit diagnostici. Non sono destinati alla somministrazione clinica umana o veterinaria diretta.
